Determination of Catechin Content and Antioxidant Activity of Brewed and Ethanolic Extracts of Cacao Beans (Theobroma cacao L.) Using Uv-Vis Spectrophotometry / Penetapan Kadar Katekin dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari Seduhan dan Ekstrak Etanol Biji Kakao (Theobroma cacao L.) Secara Spektrofotometri Uv-Vis

Introduction: Cocoa beans (Theobroma cacao L.) are widely recognized as a rich source of bioactive polyphenolic compounds, particularly flavan-3-ols such as catechin and epicatechin, which exhibit potent antioxidant properties. These secondary metabolites play a critical role in neutralizing free radicals, thereby mitigating oxidative stress implicated in various degenerative diseases. Objective: This study aimed to compare catechin equivalent content and DPPH radical scavenging activity between ethanolic extract (maceration with 70% ethanol) and aqueous infusion (90°C, 15 min) of cocoa beans. Methods: Phytochemical screening was conducted qualitatively. Catechin equivalent content was determined using UV-Vis spectrophotometry at 280 nm, while antioxidant activity was evaluated using the DPPH method at 515 nm with vitamin C as positive control. Results: Both samples contained alkaloids, flavonoids, saponins, tannins, triterpenoids/steroids, polyphenols, and glycosides. The ethanolic extract exhibited higher catechin equivalent content (37.15 ± 0.07 µg/mL) compared to the infusion (19.83 ± 0.10 µg/mL), corresponding to 12.53 ± 0.72 mg/g and 11.18 ± 1.72 mg/g, respectively. The DPPH assay revealed superior antioxidant activity for the ethanolic extract (IC₅₀ = 83.29 µg/mL; strong category) compared to the infusion (IC₅₀ = 192.65 µg/mL; weak category), with vitamin C showing IC₅₀ = 2.95 µg/mL (very strong). Conclusion: Ethanolic maceration is more effective than aqueous infusion for extracting catechin equivalents and achieving higher antioxidant activity from cocoa beans. Further confirmation using HPLC-DAD or LC-MS is recommended to validate specific catechin concentrations.

Pendahuluan: Biji kakao (Theobroma cacao L.) dikenal sebagai sumber senyawa bioaktif polifenol yang kaya, khususnya flavan-3-ol seperti katekin dan epikatekin, yang memiliki aktivitas antioksidan potensial. Metabolit sekunder ini berperan penting dalam menetralkan radikal bebas, sehingga mengurangi stres oksidatif yang terkait dengan berbagai penyakit degeneratif.. Tujuan: Penelitian ini bertujuan membandingkan kadar setara katekin dan aktivitas peredaman radikal DPPH antara ekstrak etanol (maserasi dengan etanol 70%) dan infusa akuades (90°C, 15 menit) biji kakao. Metode: Skrining fitokimia dilakukan secara kualitatif. Kadar setara katekin ditentukan menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada 280 nm, sedangkan aktivitas antioksidan diuji dengan metode DPPH pada 515 nm menggunakan vitamin C sebagai kontrol positif. Hasil: Kedua sampel mengandung alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid/steroid, polifenol, dan glikosida. Ekstrak etanol menunjukkan kadar setara katekin lebih tinggi (37,15 ± 0,07 µg/mL) dibandingkan infusa (19,83 ± 0,10 µg/mL), setara dengan 12,53 ± 0,72 mg/g dan 11,18 ± 1,72 mg/g. Uji DPPH menunjukkan aktivitas antioksidan ekstrak etanol (IC₅₀ = 83,29 µg/mL; kategori kuat) superior dibandingkan infusa (IC₅₀ = 192,65 µg/mL; kategori lemah), dengan vitamin C menunjukkan IC₅₀ = 2,95 µg/mL (sangat kuat). Kesimpulan: Maserasi etanol lebih efektif daripada infusa akuades untuk mengekstraksi setara katekin dan menghasilkan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dari biji kakao. Konfirmasi lebih lanjut menggunakan HPLC-DAD atau LC-MS direkomendasikan untuk memvalidasi konsentrasi katekin spesifik.