Combination Activity of Ethanolic Extract of Kersen Leaves (Muntingia calabura L.) and Chloramphenicol Against Salmonella typhi / Aktivitas Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Kersen (Muntingia calabura L.) dan Kloramfenikol Terhadap Salmonella typhi

Background: Typhoid fever, caused by Salmonella typhi, remains a significant health burden. Chloramphenicol is a first-line antibiotic for its treatment; however, increasing bacterial resistance necessitates alternative therapeutic strategies. Combining antibiotics with natural compounds is a potential approach to overcome resistance and reduce antibiotic doses. Kersen leaves (Muntingia calabura L.) have been reported to contain bioactive compounds with antibacterial properties. Objective: This study aimed to evaluate the in vitro interaction between ethanolic extract of kersen leaves and chloramphenicol against Salmonella typhi using the checkerboard assay method. Methods: The ethanolic extract was obtained through maceration. Phytochemical constituents were analyzed qualitatively using tube tests and Thin-Layer Chromatography (TLC) with silica gel GF254 as the stationary phase and a chloroform:methanol (8:2 v/v) mobile phase. The antibacterial activity, expressed as Minimum Inhibitory Concentration (MIC), was determined for both the single extract and chloramphenicol using the microdilution method with resazurin indicator. The interaction between the two agents was assessed using the checkerboard assay, and the Fractional Inhibitory Concentration Index (FICI) was calculated. Results: Phytochemical screening revealed that the ethanolic extract of kersen leaves contained alkaloids, steroids, flavonoids, tannins, and saponins. The MIC value of chloramphenicol alone was 19.5 µg/mL, while the extract alone showed an MIC of >1000 µg/mL against S. typhi. The checkerboard assay results indicated an increase in the MIC of chloramphenicol in combination with the extract; however, the FICI value could not be definitively determined due to the inability to establish the extract's MIC in the combination. Conclusion: The ethanolic extract of kersen leaves contains various secondary metabolite groups. While chloramphenicol exhibited antibacterial activity, the extract alone did not show inhibitory activity at the tested concentrations. The combination test suggested a potential alteration in the effectiveness of chloramphenicol, but the interaction type (synergistic, additive, indifferent, or antagonistic) could not be conclusively classified. Further investigation using fractionated or isolated compounds from the leaves is recommended.

Latar Belakang: Demam tifoid yang disebabkan oleh Salmonella typhi masih menjadi beban kesehatan yang signifikan. Kloramfenikol merupakan antibiotik lini pertama untuk pengobatannya, namun peningkatan resistensi bakteri menuntut strategi terapi alternatif. Kombinasi antibiotik dengan senyawa alam merupakan pendekatan potensial untuk mengatasi resistensi dan mengurangi dosis antibiotik. Daun kersen (Muntingia calabura L.) dilaporkan mengandung senyawa bioaktif dengan sifat antibakteri. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi interaksi in vitro antara ekstrak etanol daun kersen dan kloramfenikol terhadap Salmonella typhi dengan metode checkerboard assay. Metode: Ekstrak etanol diperoleh melalui maserasi. Kandungan fitokimia dianalisis secara kualitatif menggunakan uji tabung dan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dengan fase diam silika gel GF254 dan fase gerak kloroform:metanol (8:2 v/v). Aktivitas antibakteri, dinyatakan sebagai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM), ditentukan untuk ekstrak tunggal dan kloramfenikol menggunakan metode mikrodilusi dengan indikator resazurin. Interaksi antara kedua agen dinilai dengan checkerboard assay, dan Fractional Inhibitory Concentration Index (FICI) dihitung. Hasil: Skrining fitokimia mengungkapkan bahwa ekstrak etanol daun kersen mengandung alkaloid, steroid, flavonoid, tanin, dan saponin. Nilai KHM kloramfenikol tunggal adalah 19,5 µg/mL, sedangkan ekstrak tunggal menunjukkan KHM >1000 µg/mL terhadap S. typhi. Hasil checkerboard assay menunjukkan peningkatan KHM kloramfenikol dalam kombinasi dengan ekstrak; namun, nilai FICI tidak dapat ditentukan secara definitif karena tidak dapat ditetapkannya KHM ekstrak dalam kombinasi tersebut. Kesimpulan: Ekstrak etanol daun kersen mengandung berbagai golongan metabolit sekunder. Meskipun kloramfenikol menunjukkan aktivitas antibakteri, ekstrak tunggal tidak menunjukkan aktivitas hambat pada konsentrasi yang diuji. Uji kombinasi mengisyaratkan potensi perubahan efektivitas kloramfenikol, tetapi jenis interaksinya (sinergis, aditif, indifferent, atau antagonis) tidak dapat diklasifikasikan secara pasti. Investigasi lebih lanjut menggunakan fraksi atau senyawa terisolasi dari daun disarankan.